体外转录的步骤有哪些


转录通常发生在生物体内 , 如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件 , 在体外无细胞系统中 , 用DNA作为模板 , 模仿体内转录过程生成RNA , 这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途 , 该技术被称为体外转录 。
【体外转录的步骤有哪些】体外转录的步骤如下:
1、提取cDNA质粒;
2、线性化质粒;
3、纯化质粒:加等体积的Tris苯酚氯仿到100微米限制内切酶消化体系 , 涡旋振荡20秒,13000克离心5分钟 。上清转移 , 加入2倍体积无水乙醇和1比10体积的的